Индикатор бромкрезоловый пурпурный изменяет цвет с пурпурного на желтый в присутствии кислоты. Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, образуют кислоту, которая приводит к изменению цвета среды. Чувствительность метода увеличивается при относительно большом объеме проб (объем флакона для проб 100 мл). Добавление МУГ (4метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида), расщепляющегося с образованием продукта-флуорохрома, позволяет идентифицировать E.coli. МУГ гидролизуется ферментом β-глюкуронидазой, имеющимся только у E.coli, с образованием 4-метилумбеллиферона, флуоресцирующего в УФ-лучах с длиной волны около 366 нм.

Учет результатов:
Желтое окрашивание образца после 24 часов инкубации при температуре 35°С указывает на присутствие БГКП. Если цвет среды не изменился, инкубацию продолжают еще 24 часа. Если цвет остается красным через 48 часов инкубации, это свидетельствует об отсутствии БГКП в образце. Флуоресценция в ультрафиолетовом свете является пецифическим признаком присутствия Е. coli.

Микроорганизм                     Свойства
E. coli ATCC 25922               Рост есть
E. aerogenes ATCC               Рост есть
E. faecalis ATCC 29212         Рост отсутствует

Микроорганизм                    Свойства
E. coli ATCC 25922               Желтый цвет, флуоресценция
E. aerogenes ATCC 13048     Желтый цвет, без флуоресценции
E. faecalis ATCC 29212         Красный цвет, без флуоресценции

Состав:
На литр воды, рН 6.8±0.2
Экстракт говядины   - 3 г
Панкреатический перевар желатина   - 5,0 г
Лактоза   7,5 г
Панкреатический перевар казеина  - 10 г
Калия гидрофосфат   - 1,375 г
Калия дигидрофосфат   - 1,375 г
Натрия хлорид   - 2,5 г
Натрия лаурилсульфат   - 50 мг
Бромкрезоловый пурпурный    - 8,5 мг
МУГ   125 мг

Контроль качества и рекомендуемые условия инкубации:
Положительный контроль: E. coli ATCC 25922, инкубация 48 часов при температуре 35 °С. Проверить на наличие флуоресценции в УФ-свете с длиной волны 366 нм.
Отрицательный контроль: не ставится.
Проверка стерильности: Посев на чашки и инкубация в течение 4 дней

Этап: Исследование